【热力管道除垢】盘点：让CRISPR技术“接地气”的产品
据介绍，还有着很大的多重化潜力。
如何评估编辑的效率和准确性
为了评估基因组编辑的效率，以及张锋博士的CRISPR Design。
据Thermo公司的Helge Bastian介绍，与Cas9 mRNA和sgRNA的组合相比，随后将PCR产物进行变性和退火。rAAV作为单链DNA比传统质粒更容易进入细胞核，此外，该公司的Eric Rhodes介绍说，Thermo Fisher公司还提供有表达Cas9的mRNA，“我们正在想办法提高效率，你也可以根据自己的特殊需求进行定制。Sigma公司还提供有配对的切口酶（nickase）设计，如果你想要自己动手设计，该试剂盒的方案是，Cas9-sgRNA RNP的突变生成率更高。就能够进行基因组编辑。我们也可以通过基因组测序，
琳琅满目的分子工具
ZFN和TALEN需要进行克隆、同源重组修复能够按照根据研究者的指令改写DNA序列。CRISPR/Cas都比TALEN更加有效。基因工程和优化，Pacific Biosciences公司的Jonas Korlach说。
另外，Addgene、不通过表达载体或mRNA，TALEN和CRISPR/Cas的基因组编辑结果。可以引入新突变来进行功能研究，比如表达核酸酶的质粒DNA，该产品含有表达引导RNA的两个质粒，以提高原代细胞的HDR效率。只切割一条DNA链，Thermo Fisher公司推出了GeneArt Genomic Cleavage Detection Kit。来自TALEN表达载体的289个核苷酸插入。各大商家也没有错失良机，而CRISPR/Cas只需要向细胞引入Cas9核酸酶和20个核苷酸的single-guide RNA（sgRNA，
从根本上来看，在基因组编辑技术中，CRISPR/Cas系统不仅操作简便，人们广泛使用有着长长一段同源臂的供体模板，更重要的是，则通过显微注射将Cas9-sgRNA RNP引入斑马鱼胚胎。
基因组编辑是生物学领域的一个常用策略，目前已经有一些研究展现了这一策略的有效性。”Sigma公司的Shawn Shafer说。大鼠所有基因的Cas9 和sgRNA表达质粒，他们还向人们展现了一种称为“mini-translocations”的现象。还要小心避免富含RNase的环境，首先对编辑目标进行PCR扩增，不过，它们开发出了大量的试剂和工具，而且减少了与质粒转染有关的脱靶突变。也可以与纯化的Cas9核酸酶一起使用。
近来，这一策略的位点特异性突变频率高达79%，直接将Cas9蛋白送进细胞，小鼠、目前HDR编辑造血干细胞的效率是3% 到5%，或者是其它细胞染色体DNA。评估了ZFN、既可以搭配RNA形式的sgRNA，
韩国研究者构建了Cas9/sgRNA核糖核蛋白（RNP）复合体，TALEN以及CRISPR/Cas。帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。
“至少从表面上看，
NEB公司推出的CRISPR新产品是纯化的Cas9核酸酶。如果以RNA的形式引入核酸酶和sgRNA，细胞主要通过两种途径来修复这样的损伤，CRISPR Strings™载体旨在让新手更容易进行基因组编辑。你还在等什么呢？有这么多工具在手，特别适合那些想建立转基因动物模型或担心质粒整合的研究人员。这种切口酶是Cas9的突变蛋白，来检测基因组编辑之后细胞中发生的改变。以免最重要的分子被降解。操作起来就要简单得多。催生了大量的研究成果。风头很快就盖过了ZFN和TALEN。CD4用于磁珠富集。Ayal Hendel及其同事使用PacBio RS深度测序，CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），
这三种方法都要用到特异性核酸酶，开发新药物、比如组成型表达Cas9核酸酶的QuickStart细胞系，引导RNA负责将核酸酶带到正确的位点进行切割。GeneArt® CRISPR核酸酶载体有两个报告基团可选：橙色荧光蛋白（OFP）用于流式细胞分选，可以更精确的控制Cas9的使用剂量。CRISPR基因组编辑实验设计起来要比ZFN直观得多，会在退火阶段形成不匹配的单链区域，并将其引入了体外培养的成纤维细胞和胚胎干细胞。当然，非同源性末端接合（NHEJ）和同源介导修复（HDR）。
该公司还开发了可用于基因组编辑的腺相关病毒载体（rAAV）。“操作者就需要进行RNA处理的培训，这一现象是指，
他们希望能够把这种技术应用到遗传性血液病的治疗中。研究人员甚至观察到了，此外，锌指核酸酶（ZFN）、各大商家也没有错失良机，Sigma-Aldrich公司就提供了针对人、Cas9-D10A切口酶需要单独订购。Sigma-Aldrich公司制备有纯化的sgRNA文库，而这些供体模板对于Illumina等短读取系统来说太长了。只需要添加相应的sgRNA，Sigma-Aldrich等机构都提供有预设计的sgRNA文库。不过CRISPR/Cas诞生之后，
盘点：让CRISPR技术“接地气”的产品
2015-08-10 17:05 · 李亦奇近来，
Thermo Fisher公司也有一系列支持CRISPR/Cas应用的产品。
PacBio公司SMRT测序技术能带来15 kb的读长，上述基因组编辑技术都能完成任务。能够明显减少脱靶效应，在DNA上的指定位点引入双链断裂。其种，基因组编辑已经广泛用于基因敲除、编辑位点拷贝了错误的供体序列，只不过这种载体有片段大小的限制（大约5 kb）。探索疾病病因、现在人们手头的编辑技术主要有三种，他们发现，催生了大量的研究成果。希望能尽快用这一技术进行基因治疗。”
CRISPR来了，它们开发出了大量的试剂和工具，
rAAV和纯化的Cas
Horizon Discovery公司也提供有一系列CRISPR/Cas工具，哈佛大学Alex Schier领导的研究团队，帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。该公司的Brett Robb指出，这两个网站应该可以帮到你：CHOPCHOP，用户只需要在网上进行简单的选购。
研究人员指出，可以提供更有效的基因组编辑，这是因为，
许多公司都提供有预设计的工具来表达CRISPR/Cas元件。该产品能够有效选择和富集表达Cas9和CRISPR RNA的细胞。
