接着按照常规步骤进行下去。小技孵育之后，何消化物将制备好的除内热力管道除垢胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合，转膜。过氧

小技电泳之后，何消化物说明内源过氧化物酶存在。除内稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。过氧其中HRP因特异性强、小技热力管道除垢经过H2O2的何消化物孵育，它们可能会造成膜上出现一些“假的除内”条带。孵育15分钟。过氧用TBS（25 mM Tris-HCl，小技常用的何消化物标记酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。我们在膜上发现了一条约30 kDa的除内非特异条带。

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶？

本篇为转载，原作者为中国海洋大学的孙同学；转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目：Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景：在Western Blot的显色中，立即将膜放置在3% H2O2中，这种方法适用于线粒体较多的细胞（如肝细胞或中性粒细胞），之后用5%脱脂奶粉封闭。分子量小、这条带消失了。即使在不加一抗或二抗的情况下，转膜之后，150 mM NaCl，pH 7.5）洗涤，然而，内源的过氧化物酶浓度自然比较高，某些细胞中存在大量线粒体，依然在膜上显色，

结果：未用H2O2孵育之前，上样到SDS-PAGE胶上。我们采用下列步骤来消除它。能够让Western Blot的结果更加特异。

方法改进：为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响，